iNOS誘導(dǎo)型一氧化氮合成酶ELISA試劑盒
試劑盒性能:
1. 特異性高:由于是抗原抗體的特異性結(jié)合,因此試驗(yàn)的特異性很高,能夠排除其他物質(zhì)的干擾。
2. 靈敏度高:由于酶的放大作用,使得試驗(yàn)的靈敏度大大提高,能夠檢測(cè)出微量的抗原或抗體。
3. 操作簡(jiǎn)便:ELISA試驗(yàn)操作相對(duì)簡(jiǎn)單,容易掌握,iNOS誘導(dǎo)型一氧化氮合成酶適合于大規(guī)模樣本檢測(cè)。
4. 適用范圍廣:可以用于檢測(cè)各種抗原、抗體和激素等生物分子。
操作步驟:
ELISA試劑盒怎么選擇?
01 靈敏度
一氧化氮合成酶ELISA靈敏度—試劑盒對(duì)于被檢物質(zhì)的低檢測(cè)能力,如果我們待檢物質(zhì)濃度量很低,可以選擇高靈敏的試劑盒。靈敏度取值為空白對(duì)照的標(biāo)準(zhǔn)差對(duì)應(yīng)的濃度值的3倍。
02 特異性
特異性—判斷其他分子與試劑盒抗體的結(jié)合能力。交叉反應(yīng)越小,上海試劑盒的特異性越好。一般需要衡量試劑盒與當(dāng)前種屬同家族蛋白和其它種屬該蛋白、血清中常見因子(如異嗜性抗體、類性因子等)、靶蛋白互作蛋白無交叉反應(yīng)。
03 精密性
iNOS ELISA Kit精密性—也叫重復(fù)性,是對(duì)同一樣品重復(fù)測(cè)定時(shí)誤差大小的評(píng)估參數(shù)。一般要求板間及板內(nèi)精密性控制在10%以內(nèi)。菲恩生物使用全機(jī)器生產(chǎn),排除人工的不穩(wěn)定性,依靠電子移液槍和自動(dòng)包板機(jī)加樣,嚴(yán)格控制批內(nèi)差批間差。
04 準(zhǔn)確度
準(zhǔn)確度—一般通過加標(biāo)(spike-in)回收率來衡量,回收率在80%-120%之間為合格。通過添加標(biāo)準(zhǔn)品到天然樣本基質(zhì)內(nèi)進(jìn)行測(cè)定,以不添加標(biāo)準(zhǔn)品的天然樣本基質(zhì)為空白對(duì)照,回收率數(shù)值為靶標(biāo)的測(cè)定濃度與添加的標(biāo)準(zhǔn)品濃度比值,以百分比計(jì)?;厥章势呋蚱蜁?huì)產(chǎn)生假陽性或假陰性結(jié)果,影響測(cè)定值的準(zhǔn)確性。
05 線性
線性 —在天然樣本基質(zhì)中添加有適當(dāng)濃度的標(biāo)準(zhǔn)品,分別稀釋2倍、4倍、8倍來檢測(cè),測(cè)定各濃度下的回收率,回收率在80%-120%之間為合格。
06 穩(wěn)定性
穩(wěn)定性—一般以加速破壞性實(shí)驗(yàn)進(jìn)行驗(yàn)證,將未拆封的試劑盒在37°C和2-8°C分別放置一定時(shí)間,考察各項(xiàng)性能指標(biāo)的偏差,以偏差小于10%為合格。穩(wěn)定性越好,試劑盒存儲(chǔ)時(shí)間越長(zhǎng)。
ELISA的基本原理有三條:(1)抗原或抗體能以物理性地吸附于固相載體表面,可能是蛋白表面間的疏水性部分相互吸附,并保持其學(xué)活性; (2)抗原或抗體可通過共價(jià)鍵與酶連接形成酶結(jié)合物,而此種酶結(jié)合物仍能保持其學(xué)和酶學(xué)活性;(3)酶結(jié)合物與相應(yīng)抗原或抗體結(jié)合后,可根據(jù)加入底物的顏色反應(yīng)來判定是否有反應(yīng)的存在,而且顏色反應(yīng)的深淺是與標(biāo)本中相應(yīng)抗原或抗體的量成正比例的,因此,可以按底物顯色的程度顯示試驗(yàn)結(jié)果。由于ELISA法一方面是建立在抗原與抗體學(xué)反應(yīng)的基礎(chǔ)上,因而,具有特異性。而另一方面又由于酶標(biāo)記抗原或抗體是酶分子與抗原或抗體分子的結(jié)合物,它可以催化底物分子發(fā)生反應(yīng),產(chǎn)生放大作用,正因?yàn)榇朔N放大作用而使本法具有很高的敏感性。因此,ELISA法是一種既敏感又特異的方法。
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